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如何準(zhǔn)確測(cè)量水分活度值?
水分活度(Water Activity,簡(jiǎn)稱Aw,又稱水活性)是反應(yīng)產(chǎn)品中(食品、藥品、飼料等)平衡狀態(tài)下自由水分的多少,自由水會(huì)影響產(chǎn)品中微生物繁殖、化學(xué)特性和酶的穩(wěn)定性,對(duì)于易變質(zhì)的產(chǎn)品來說,測(cè)量其水分活度尤為重要。利用水分活度的測(cè)試,控制微生物的生長(zhǎng),計(jì)算食品和藥品的保質(zhì)期,已逐漸成為食品,醫(yī)藥,生物制品,糧食,飼料,肉制品等行業(yè)中檢驗(yàn)的重要指標(biāo)。
就食品檢測(cè)而言,大多是依據(jù)國(guó)標(biāo)《GB 5009.238-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品水分活度的測(cè)定》,此標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了“康衛(wèi)氏皿擴(kuò)散法"和“水分活度儀擴(kuò)散法"測(cè)定食品中的水分活度。傳統(tǒng)的康衛(wèi)氏皿擴(kuò)散法,操作步驟繁瑣,至少需要24小時(shí),耗時(shí)較長(zhǎng);而水分活度儀擴(kuò)散法可以在很短的時(shí)間內(nèi)得到結(jié)果,目前,此方法已被應(yīng)用于大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室。
水分活度儀擴(kuò)散法就是把被測(cè)樣品置于密閉的空間內(nèi),在保持恒溫的條件下,使樣品與周圍空氣的蒸汽壓達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡,這時(shí)就可以以氣體空間的水蒸汽壓作為樣品蒸汽壓的數(shù)值(P),同時(shí),在一定溫度下純水的飽和蒸汽壓(Po)是一定的,從而計(jì)算出被測(cè)樣品的水分活度(Aw=P/Po)。目前水分活度儀主要的測(cè)試方法有:電子濕度計(jì)法(電容或電阻傳感器法)、冷卻鏡面露點(diǎn)法。
1.電子濕度計(jì)法(電容或電阻傳感器法),此方法是利用電阻或電容傳感器來測(cè)量相對(duì)濕度。傳感器通過電容或電阻的變化,儀器將電信號(hào)和濕度信號(hào)進(jìn)行轉(zhuǎn)換,得出一個(gè)平衡相對(duì)濕度值,當(dāng)樣品溫度和傳感器溫度達(dá)到一致時(shí),平衡相對(duì)濕度數(shù)值上等于樣品水分活度。而且,每次使用前傳感器必須用標(biāo)準(zhǔn)鹽溶液進(jìn)行校準(zhǔn),水分進(jìn)入傳感器后,需要在傳感器里達(dá)到充分平衡,此過程一般需要15分鐘到1小時(shí)不等,才能使最終數(shù)值穩(wěn)定。
電子濕度計(jì)測(cè)量水分活度的優(yōu)勢(shì)是設(shè)計(jì)簡(jiǎn)單,容易實(shí)現(xiàn)小型化和集成化,但在其使用過程需要校準(zhǔn),檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng),數(shù)據(jù)穩(wěn)定性差,測(cè)量精度受測(cè)量方法的局限,精度較低。而且傳感器易受污染,保養(yǎng)維護(hù)費(fèi)用高昂。
2.冷卻鏡面露點(diǎn)法,在冷卻鏡面露點(diǎn)系統(tǒng)里,先將待測(cè)樣品放入樣品杯內(nèi),再將樣品杯密封在樣品倉(cāng)內(nèi),倉(cāng)內(nèi)有一個(gè)冷卻鏡面露點(diǎn)傳感器和一個(gè)紅外溫度傳感器。露點(diǎn)傳感器測(cè)量空氣的露點(diǎn)溫度,紅外傳感器測(cè)量樣品的溫度。當(dāng)樣品的水分活度和空氣的相對(duì)濕度達(dá)到平衡時(shí),氣體中的水蒸氣隨著鏡面的溫度逐漸降低而達(dá)到飽和時(shí),開始析出凝析物,此時(shí)所測(cè)量到的鏡面溫度即為該大氣壓下氣體的露點(diǎn),通過露點(diǎn)溫度和樣品溫度計(jì)算水分活度。倉(cāng)內(nèi)有一個(gè)風(fēng)扇,幫助加速達(dá)到平衡,并控制露點(diǎn)傳感器的邊界層阻力。
冷卻鏡面露點(diǎn)方法在于檢測(cè)的速度和精度,該方法是基于基礎(chǔ)熱力學(xué)原則測(cè)量相對(duì)濕度的主要方法,由于測(cè)量是在溫度測(cè)量的基礎(chǔ)上,可以在五分鐘之內(nèi)測(cè)量精度達(dá)到(+0.0030Aw),而且這種測(cè)量方法一般無需校準(zhǔn)。如果有問題,可以很容易地接觸到鏡面并對(duì)鏡面進(jìn)行清潔,維護(hù)非常簡(jiǎn)單。
冷卻鏡面露點(diǎn)方法是經(jīng)AOAC國(guó)際認(rèn)證的首要的測(cè)量水分活度的方法,并且是可以溯源到國(guó)家國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)的方法。如eFAst-Lab 水分活度儀就是采用可溯源的冷卻鏡面露點(diǎn)方法,是美國(guó)USP和FDA推薦使用的方法,能夠在5分鐘內(nèi)快速測(cè)量樣品的水分活度。對(duì)一些用戶而言,可以快速讀數(shù)并進(jìn)行在線監(jiān)測(cè)水分活度。這種方法可以追溯到NIST以及國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法,為廣大食品科學(xué)研究人員和檢驗(yàn)人員廣泛應(yīng)用。
兩種測(cè)量方法的區(qū)別:
兩種測(cè)量方法的差別性主要體現(xiàn)在精度、測(cè)量速度、可重復(fù)性、校準(zhǔn)的穩(wěn)定性、線性及使用的方便程度。
測(cè)量方法 | 電容或電阻傳感器法 | 冷凝鏡面露點(diǎn)法 |
測(cè)量范圍 | 0.6~0.9aw | 0.0500~1.000aw |
精度 | ±0.01~0.02aw | ±0.0030aw |
測(cè)量速度 | 15~90 min | 3~5 min |
校準(zhǔn) | 需用標(biāo)準(zhǔn)鹽容液進(jìn)行校準(zhǔn) | 一般無需校準(zhǔn) |
維護(hù) | 傳感器易受污染,保養(yǎng)維護(hù)費(fèi)用高昂 | 可以很容易地接觸到鏡面并對(duì)鏡面進(jìn)行清潔,維護(hù)簡(jiǎn)單 |
認(rèn)證 | 國(guó)標(biāo) | 國(guó)標(biāo)、中國(guó)藥典、ISO、AOAC國(guó)際認(rèn)證、美國(guó)USP、FDA |
影響水分活度值的重要參數(shù)
如何準(zhǔn)確測(cè)量水分活度值呢?除了選用合理的檢測(cè)方法之外,也要注意一個(gè)非常重要的參數(shù),即“溫度",國(guó)標(biāo)中明確要求“在溫度20~25℃,相對(duì)濕度50%~80%的條件下測(cè)定"。由于不同季節(jié),不同場(chǎng)所,環(huán)境溫度及樣品溫度有所差異,而溫度對(duì)飽和鹽溶液影響較大,因此溫度對(duì)水分活度儀的測(cè)試結(jié)果影響也較大。
由此,在檢測(cè)過程中,要保證環(huán)境溫度在20~25℃,同時(shí),待測(cè)樣品也需要恢復(fù)到20~25℃再進(jìn)行檢測(cè),這樣檢測(cè)出來的結(jié)果才能更準(zhǔn)確。常規(guī)的水分活度儀,在回溫的過程中,樣品只能單純的依靠環(huán)境溫度的熱傳遞,一般需要比較長(zhǎng)的恢復(fù)時(shí)間,而且環(huán)境溫度的不均勻性,可能導(dǎo)致實(shí)際測(cè)試條件無法達(dá)到國(guó)標(biāo)要求,導(dǎo)致測(cè)量結(jié)果不準(zhǔn)確。
現(xiàn)在市面上有一種可控溫型水分活度儀,可以使盛放樣品的測(cè)量倉(cāng)迅速達(dá)到檢測(cè)溫度(如25℃),幫助客戶在樣品環(huán)境溫度下快速、準(zhǔn)確的測(cè)定結(jié)果。另外,可以有效測(cè)定不同溫度條件下樣品的水分活度,幫助客戶了解溫度對(duì)水分活度的影響程度,為產(chǎn)品的儲(chǔ)存溫度和包裝條件提供有效的判斷依據(jù),特別適用于高??蒲袡C(jī)構(gòu)及大型企業(yè)的研發(fā)工作。
意大利Steroglass斯特洛WaterLab水分活度儀,測(cè)量原理為“鏡面冷卻露點(diǎn)傳感器",分辨率高達(dá)0.0001aw,準(zhǔn)確性0.003aw,滿足儀器全量程測(cè)量范圍。在實(shí)際檢測(cè)時(shí),只需稱量3-5g菌粉樣品放入樣品杯內(nèi),5min左右即可快速得到準(zhǔn)確測(cè)定結(jié)果。溫度控制范圍:15-50℃,它可以使倉(cāng)內(nèi)菌粉的溫度迅速達(dá)到溫度(如25℃),縮短檢測(cè)時(shí)間,提高樣品的準(zhǔn)確性。